NAD蘋(píng)果酸脫氫酶(NADMDH)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義：

MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋(píng)果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴(lài)的MDH和NADP-依賴(lài)的MDH，細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細(xì)胞中，NAD-MDH分布?杈?

測(cè)定原理：

NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

高遷移率族ATHook蛋白2ELISA試劑盒 HMGA2免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白B1ELISA試劑盒 GOLGB1免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A8家族成員AELISA試劑盒 GOLGA8A免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A7ELISA試劑盒 GOLGA7免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A6ELISA試劑盒 GOLGA6免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A5ELISA試劑盒 GOLGA5免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A4ELISA試劑盒 GOLGA4免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A3ELISA試劑盒 GOLGA3免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A2ELISA試劑盒 GOLGA2免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基體蛋白A1ELISA試劑盒 GOLGA1免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基糖蛋白1ELISA試劑盒 GLG1免費(fèi)代測(cè)試劑

高爾基磷蛋白3ELISA試劑盒 GOLPH3免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾su調(diào)節(jié)因子9ELISA試劑盒 IRF9免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾su調(diào)節(jié)因子4ELISA試劑盒 IRF4免費(fèi)代測(cè)試劑

干擾su調(diào)節(jié)因子1ELISA試劑盒 IRF1免費(fèi)代測(cè)試劑
NAD蘋(píng)果酸脫氫酶(NADMDH)測(cè)試盒銅藍(lán)蛋白(CP)測(cè)試盒/比色法50管/48樣

銅藍(lán)蛋白(Cp)含量測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

銅藍(lán)蛋白(Cp)含量測(cè)試盒/微量法100T/48S

土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)測(cè)試盒/微量法100管/48樣

土壤α-葡萄糖苷酶(S-α- GC)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)測(cè)試盒/微量法100管/48樣

土壤β木糖苷酶(S-β-XYS)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

土壤β木糖苷酶(S-β-XYS)測(cè)試盒/微量法100T/48S
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。