產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述：

使用及效果：將產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒說明書與用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合后，直接進行PCR反應（PCR 參數(shù)由用戶自己確定），反應結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。

更新時間：2024-09-01;廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商;覽量：1346

本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品，含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。?

1. 方便，用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷，操作步驟已經(jīng)限度地簡化，能減少污染，降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料，PCR 反應液可直接上樣電泳，進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化，反應的靈敏度高，特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆，不需要額外的加A 反應。
使用及效果：將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合后，直接進行PCR反應（PCR 參數(shù)由用戶自己確定），反應結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。

以下是產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒說明書的產(chǎn)品介紹：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	分類
產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒說明書	Providencia alcalifaciensPCR	PCR檢測試劑盒

組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、樣品稀釋液：1×20ml。
4、檢測稀釋液A：1×10ml。
5、檢測稀釋液B：1×10ml。
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
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