目前常用的幾種elisa試劑盒白介素類方法有：測(cè)定抗體的間接法，測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法等。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)。其主要過程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi)，加待測(cè)抗體，保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì)，加酶標(biāo)抗抗體，保溫后洗滌，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿終止酶促反應(yīng)，用目測(cè)或光電 比色測(cè)定抗體量。
ELISA試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長(zhǎng)一段時(shí)間，跟著自己技術(shù)水平得進(jìn)步，或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣，也是熟能生巧吧，現(xiàn)在做方陣，做ELISA已是輕車熟路了，以前檢測(cè)一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色，一個(gè)工作日基本搞定。可是在新老手操縱過程中老是會(huì)泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA時(shí)就面對(duì)良多災(zāi)題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說花板，假陽性，全顯色，全部顯色。
①抗原包被：兔抗人IgG 作為抗原，用包被液l：8000稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。
②洗滌：次日傾去凹孔內(nèi)的液體，洗滌液洗3次。
③封閉：加l00μL/孔封閉液，室溫放置0.5h.
④洗滌：用洗滌液洗3次。
⑤加待測(cè)樣品(一抗)：elisa試劑盒白介素類將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另-塊板上用PBS 連續(xù)稀釋(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，ELISA試劑盒每個(gè)樣品平行做兩份，PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品作為陽性對(duì)照。加蓋37℃恒溫箱溫育 1~2h。
⑥洗滌：用洗滌液洗3次。
產(chǎn)品名稱: Anti-CD138/Syndecan-1 規(guī)格： 0.1ml 多配體蛋白聚糖1抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD14 規(guī)格： 0.1ml CD14/內(nèi)毒素受體抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD14 規(guī)格： 0.1ml CD14抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD141 規(guī)格： 0.1ml 凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD144/VECD 規(guī)格： 0.1ml 上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD146/MCAM 規(guī)格： 0.1ml 黑色素瘤細(xì)胞粘附分子CD146抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD147/EMMPRIN 規(guī)格： 0.1ml 細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD147/EMMPRIN 規(guī)格： 0.1ml 單核-巨噬細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶抗體
產(chǎn)品名稱: Anti-CD158a/KIR2DL1 規(guī)格： 0.1ml NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體
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